PCR के उपयोग से जीन प्रवर्धन की अभिक्रिया के दैरान यदि आरंभ में उच्च तापमान बना नहीं रहता तब निम्न में PCR का कौन सा चरण पहले प्रभावित होगा?

  1. लाइगेशन
  2. तापानुशीलन
  3. प्रसार
  4. निष्क्रियकरण

Answer (Detailed Solution Below)

Option 4 : निष्क्रियकरण
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सही उत्तर विकल्प 4 है।

उत्तर

अवधारणा:

  • पॉलिमरेज शृंखला अभिक्रिया​ (PCR) का उपयोग रोगों के निदान, ब्याज के नमूने में रोगजनक जीवाणु की उपस्थिति आदि के लिए किया जाता है।
  • PCR में, दो सेट उपक्रामकों और एक DNA पॉलिमरेज एंजाइम का उपयोग करके DNA के पूरक की कई प्रतियां तैयार की जाती हैं।

F1 Utkarsha Ravi 23.08 (10)

व्याख्या:

आइए PCR में चरणों को देखें:

निष्क्रियकरण

  • इस प्रक्रिया में PCR के दो रज्जुक को बहुत अधिक तापमान (94 से 98 डिग्री) पर गर्म करके अलग किया जाता है।
  • यदि उच्च तापमान को बनाए नहीं रखा जाता है तो निष्क्रियकरण नहीं होगा।
  • दो रज्जुक के बीच हाइड्रोजन आबंध टूटते हैं औ एकल रज्जुक बनते हैं

तापानुशीलन

  • इस चरण में, उपक्रामक का उपयोग किया जाता हैउपक्रामक DNA के एकल रज्जुक के साथ अन्योन्यक्रिया करते है।
  • उपक्रामक और उसके पूरक DNA रज्जुक (टेम्पलेट DNA) के बीच एक जोड़ी है।
  • उपक्रामक और टेम्प्लेट DNA के बीच उचित संकरण के लिए उचित तापमान (विकृतीकरण के लिए उपयोग किए जाने वाले तापमान से कम) प्रदान किया जाता है।
  • DNA पोलीमरेज़ एंजाइम उपक्रामक -टेम्पलेट संकर से जुड़ जाता है और DNA का संश्लेषण शुरू हो जाता है।

प्रसार

  • एंजाइम टाक पोलीमरेज़ (बैक्टीरिया थर्मस एक्वाटिकस से प्राप्त) का उपयोग यहां किया जाता है और तापमान 75 से 80 डिग्री बनाए रखा जाता है।
  • एंजाइम 5'-3' दिशा में न्यूक्लियोटाइड जोड़ते हैं और पूरक DNA रज्जुक को संश्लेषित करते हैं।
  • DNA की लाखों प्रतियां प्राप्त करने के लिए इस चक्र को कई बार (लगभग 30 बार) दोहराया जा सकता है

अतः, सही उत्तर विकल्प 4 है।

अतिरिक्त जानकारी:

  • लाइगेशन: DNA लाइगेज़ लाइगेशन का कार्य करता है। यह मिलान सिरों के साथ DNA के दो टुकड़े करता है ।
  • इस प्रक्रिया का उपयोग प्लास्मिड में जीन और DNA के खंड डालने के लिए किया जाता है।
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